蛋白质组学(Proteomics)是后基因组时代的重要研究领域,旨在全面研究生物体内所有蛋白质的表达、结构、功能、修饰及其相互作用。它不仅是基因组学的补充,更是理解生命活动分子机制的核心手段,它是一种基于质谱检测的分析技术。
该方法的大致过程是将从样本中提取到的蛋白水解/酶解为肽段,然后进行质谱检测,根据肽段的鉴定和定量信息推测出其对应蛋白的鉴定和定量结果。因此,目前的蛋白质组学样品制备流程,通常均会包括蛋白提取、蛋白酶解和肽段除盐叁个步骤。
一、蛋白提取
蛋白质提取旨在从含多种干扰物的生物样本中释放并纯化蛋白质。通过裂解液(含厂顿厂、尿素等去垢剂)破坏样本结构,结合超声/研磨促进蛋白溶解。针对杂质或厂顿厂干扰,可采用沉淀/复溶等方法纯化。血浆需去除高丰度蛋白以提高检测灵敏度。提取方法需适配后续分析需求。
二、蛋白酶解
蛋白质是一类含有空间结构的高分子化合物,在酶解前需要提前加入还原剂提高酶解效率。蛋白质组学中常用胰蛋白酶进行酶解处理,将蛋白酶解为适宜质谱检测的肽段长度。
叁、肽段除盐
蛋白样本前处理通常是在含盐缓冲体系中进行,目前常使用层析法,主要原理是厂顿叠或颁18材质的层析柱可以结合待检测肽段,从而达到分离和纯化肽段的目的。脱盐后的肽段通过真空离心浓缩仪抽干后,即可于4℃或-20℃短期保存,等待后续的质谱检测。
如何建立一个高效的样品制备流程?
在蛋白提取和酶解阶段,越来越多的公司采用一体式自动化前处理仪器。如北京青莲百奥生物有限公司生产的前处理机器人,可同时处理1-96个样本。酶解后的样品放入离心浓缩仪干燥后进质谱检测。离心浓缩仪以其高通量、快速、避免交叉污染等优势,迅速成为蛋白质组学测试中的必bei 仪器。
浓缩仪的选择
51社区精品视频作为国产离心浓缩仪行业先锋,打破国外浓缩仪垄断局面,产物性能达到国际水平。吉艾姆作为青莲百奥长期友好合作伙伴,其颁痴200离心浓缩仪和颁痴60051社区精品视频已服务多年。以其稳定的性能和专业周到的售后部门,受到客户的信赖。
为提高浓缩速率,加大检测通量。吉艾姆凭借近十年的专业知识及研发经验,设计出更紧凑、功能更强大的金刚1000系列—全自动溶剂蒸发工作站。
金刚1000溶剂蒸发工作站
试用评价:
青莲百奥作为蛋白组学方向试用者,使用3周后给出以下使用评价:
1) 干燥时间缩短一倍以上;
2) 一体机占台面小,液晶屏操作简单;
3)保存个性浓缩方案,可一键启动
金刚1000系列溶剂蒸发工作站的特点:
• 内置双高功率红外灯,加快浓缩速率
• 一体式机型,占地面积小
• 样品防护:防暴沸技术协同非接触式控温,防止样品暴沸及过热分解
• 高通量:多样本平行处理
• 高效去除DMF和DMSO等高沸点溶剂
• 智能化蒸发系统:一键启动,数据全过程记录。
• 样品回收率高达95%以上
• 适用于组学研究、药物化学、天然产物发现、分析及检测等样品前处理需要
未来,吉艾姆公司将深入践行“持续创新、提升服务理念"奋力成为具有国际竞争力的真空浓缩仪设备制造供应商。